Detección y genotipificación de papiloma virus humano por PCR-RFLP en pacientes atendidas en el hospital distrital Walter Cruz Vilca La Libertad-2015
Resumen
Resumen
Esta investigación tuvo como objetivo detectar ygenotipificar el virus de papiloma humano (VPH)causante del cáncer de cuello uterino (CCU), aplicandola técnica de reacción en cadena de la polimerasa(PCR). Para el análisis se obtuvo muestras de tejidoendocervical con resultados normales en la citología. Seprocedió a la extracción, purificación y amplificación deDNA utilizando primers genéricos My09 / My11; siendolas secuencias de primers cp-pvh (450 pares de bases) ybeta globina (268 pares de bases), se utilizó una enzimade restricción llamada endonucleasa Afa-I en aquellos casos donde se detectó amplificación del genomaviral del VPH (casos interpretados como positivo). Sedetectó VPH en 03 muestras de pacientes, ademásse obtuvo como resultado que 01 de las muestraspositivas presentó genotipificación para VPH tipo 16denominado VPH de alto riesgo oncogénico; asimismolas otras dos muestras no presentaron genotipificaciónpara las que genotipifica la enzima Afa-I
Palabras Clave: Papiloma virus humano, PCR-RFLP,genotipificación, enzima de restricción.
Abstract
This research aimed to detect and genotype human papillomavirus (HPV) causing cervical cancer (CCU)using the polymerase chain reaction (PCR) technique.Endocervical tissue samples were obtained with normalcytology results for analysis. DNA extraction, purification and amplification were performed using My09 / My11 generic primers, cp-pvh primers (450 base pairs), and beta globin (268 base pairs) were used, a restriction enzyme called endo nuclease Afa-I in those cases where amplification of the HPV viral genome was detected(cases interpreted as positive). HPV was detected in 03 patient samples; in addition, it was obtained that 01 of the positive samples presented genoty ping for HPV type 16 called HPV of high oncogenic risk; The other two samples did not present.
Key words: Human papilloma virus, PCR-RFLP,genotyping, restriction enzyme.
