EVALUACIÓN DEL DAÑO DE ADN DE LINFOCITOS HUMANOS EXPUESTOS A CIPERMETRINA Y EXTRACTO ETANÓLICO DE SEMILLAS DE VITIS VINIFERA L. (VITACEAE) “UVA”

Abstract

Resumen

El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar el daño al ADN de linfocitos humanos inducidos por cipermetrina y el efecto protector del extracto etanólico de semilla de Vitis vinifera L. (Vitaceae) “uva” se utilizó la electroforesis alcalina de una sola célula (ensayo cometa). Los linfocitos fueron aislados de muestras de sangre obtenidas de 6 donantes sanos, no fumadores con un rango de edad de  20  y  26  años  y  se  cultivaron  en  Karyotyping  Medium  GIBCO™  PB-MAX™  por  24  horas.  Los  linfocitos  fueron  sometidos  a  un  pre-tratamiento  con  soluciones  de  extracto  etanólico  de  semilla  de Vitis  vinífera  L.  “uva”  a  concentraciones  de  15  y  40  ppm  durante  1  hora  y  transcurrido  este  tiempo  fueron  tratados  con  cipermetrina  a  una  concentración  de  20  ppm.  Para  el  ensayo  cometa  se  usó  el  método  establecido  por  Olive  et  al., 1992 modificado por Castillo, 2012. Los resultados permitieron apreciar que los linfocitos expuestos al extracto etanólico de semilla de Vitis vinífera L. (Vitaceae) “uva” y Cipermetrina muestran una disminución frente al daño en el ADN inducido por Cipermetrina.

Palabras clave: Vitis vinifera, cipermetrina, ensayo cometa, daño del ADN.

 

Abstract

The present study objective of evaluating the DNA damage in human lymphocytes induced by cypermethrin and the protective effect of the ethanolic extract of Vitis vinifera L. (Vitaceae) “grape” seeds.  This study used the alkaline single-cell gel electrophoresis (comet assay). Lymphocytes were isolated from blood samples obtained from 6 healthy, non-smokersdonors, within an age range of 20-26  years,  and  afterwards  cultured  in  GIBCO  ™  PB-MAX™  Karyotyping  Medium  which  was  incubated  at  37  °  C  for  24  hours.  Lymphocytes  were  pre-treatedwith  an  ethanolic  extract  of  Vitis vinifera L. (Vitaceae) “grape” seed solution at concentrations of 15 and 40 ppm for 1 hour and after this  time  they  were  treated  with  Cypermethrin  at  a  concentration  of  20  ppm,  hydrogen  peroxide  50  mM  was  considered  as  positive  control  and  Phosphate  Buffer  (PBS)  as  a  negative  control.  The  comet assay was done following the method established by Olive et al., 1992. The results showed that lymphocytes exposed to the ethanolic extract of Vitis vinifera L. (Vitaceae) “grape” seeds and cypermethrin presented a DNA damage diminution induced by Cypermethrin; thus it’s concluded that pretreatment of lymphocytes with ethanolic extract of V. vinifera L. (Vitaceae) seeds significantly reduces DNA damage caused by cypermethrin.

Keywords: Vitis vinifera, cypermethrin, comet assay, DNA damage.