Biofilm de E. Faecalis. Susceptibilidad ante irrigantes endodónticos. Estudio al MEB

Abstract

Resumen

Objetivos. a) evaluar la acción de soluciones de irrigación sobre el biofilm de Enterococcusfaecalis al microscopio electrónico de barrido(MEB) y b) observar el desarrollo bacteriano determinando las unidades formadoras de colonias(UFC) después de la acción de los irrigantes.

Materiales y métodos. a) Se incubaron 36 discos de raíces dentarias con E. faecalis durante14 días y fueron divididos en seis grupos según el irrigante empleado, el que actuó durante 5 minutos: grupo 1 (n=6): hipoclorito de sodio(NaOCl) 1%, grupo 2 (n=6): NaOCl 2,5%, grupo3 (n=6): gluconato de clorhexidina (CHX) 1%,grupo 4 (n=6): CHX 2 %, grupo 5 (n=6): Iodoioduro de potasio (IKI) 0,3% y grupo 6 (n=6):agua destilada (control). La mitad de las piezas(n=3) de cada grupo fueron observadas al MEB evaluando el biofilm según Estrela y col. 2009.La otra mitad (n=3) de cada grupo se incubaron individualmente en medio de cultivo estéril y se realizó el recuento de UFC a las 24 y 48 hs.

Resultados. a) Con NaOCl 1 y 2,5% no se detectó presencia de biofilm, con CHX 1% y 2% se observaron áreas colonizadas con invasión de los túbulos dentinarios (grado 2) con IKI 0,3% se observaron la mayoría de las áreas colonizadas con invasión de los túbulos dentinarios(grado 3), en el grupo control todas las áreas se observaron cubiertas sobre los túbulos dentinarios(grado 4). b) el recuento de UFC a las 24 y 48 hs. dio los siguientes resultados: NaOCl1% 24 hs sin crecimiento, 48 hs crecimiento (14X 102), NaOCl 2,5% sin crecimiento a las 24 y 48 hs. 1% CHX 24h crecimiento 16x102, 48 hs crecimiento 18x104. CHX 2% 24hs crecimiento 24x102, 48hs crecimiento 27x103. IKI 0,3% a 24hs crecimiento 12x108. Agua destilada (control)a 24 hs crecimiento 23x108.

Conclusiones. Al MEB el biofilm de E. faecalis fue eliminado por NaOCl 2,5% y NaOCl 1%,mientras que CHX 1% y 2% afectaron el biofilm pero no lo eliminaron. IKI y agua destilada (control)no mostraron afectar al biofilm. Con respecto al recuento de UFC, al emplear NaOCl 2,5% no se observó desarrollo hasta las 48 hs mientras que al irrigar con el resto de las soluciones experimentales y con el control hubo desarrollo bacteriano.(Parcialmente subsidiado por el Consejo de Investigación de la Universidad Nacional de Tucumán, Argentina).

Palabras clave: Biofilm, NaOCl, CHX, MEB.

Abstract

The aim of this study was to a) to evaluate the action of irrigating solutions on the biofilm by scanning electron microscopy (SEM) and b)identifying bacterial colony which forms units(CFU) after the action irrigating solutions.

Materials and Methods. a) 36 dental roots discs were incubated with E. faecalis for 14 days and they were divided into six groups according to the irrigant employed, which acted during 5 minutes:group 1(n = 6): sodium hypochlorite (NaOCl)1%, group 2(n = 6): NaOCl 2 5%, group 3(n = 6):chlorhexidine gluconate (CHX) 1%, group 4(n =6): 2% CHX, group 5(n = 6): Iodine and potassiumiodide (IKI) 0.3 % and group 6(n = 6): distilled water (control). Half of the pieces (n = 3) of each group were observed by SEM according to Estrelaet al. 2009. The other half of each group was incubated amid sterile cultivation and the CFU recount took place at 24 and 48 hours.

Results a) With NaOCl of 1% and 2.5% no fiofilm presence was detected, with CHX 1% and 2%we identified few areas colonized with invasion of dentinal tubules (grade 2), with 0.3% IKI mostareas with invasion of dentinal tubules (grade 3) were monitored, in the control group all areas were observed covering the dentinal tubules(grade 4). b) the recount of the CFU at the 24 and 48 hours gave us the following results: nogrowth at the 24 hours in the 1% NaOCl, grow that the 48 hours (14 X 102), no growth at 24 and 48 hours in the 2.5% NaOCl, growth at the 24 hours in % CHX 16x102, growth at the 48 hours 18x104. Growth at the 24 hours in CHX 2%24x102, growth at the 48 hours 27x103, growthat the 24 hours in the IKI 0.3% 12x108. Growthat 24 hours of distilled water 23x108.

Conclusions. The SEM biofilm of E. faecalis was eliminated by 2.5% NaOCl and 1% NaOCl while CHX 1% and 2% affected the biofilm but did not remove it. IKI and distilled water(control) did not affect the biofilm. With regard to the UFC recount, when using the NaOCl 2.5% it presented no development until 48 hours while the irrigation with the rest of the experimental solutions and with the control showed bacterial development.

(Partially subsidized by The Research Council of National University of Tucumán, Argentina).

Key words: Biofilm, NaOCl, CHX, SEM.